Rachelle Marie Lefevre urodziła i wychowała się w Montrealu (Kanada). Jej ojciec jest nauczycielem języka angielskiego, a matka psychologiem. Rachelle ma trzy siostry i mówi zarówno po francusku, jak po angielsku. Podczas gdy rodzina jej ojca pochodzi z Francji, Lefevre dorastała posługując się w większości językiem angielskim. Uczęszczała do Centennial Academy, prywatnego liceum, a później studiowała sztuki kreatywne w Dawson College. Studiowała teatr przez dwa lata w Walnut Hill School w Natick, w Massachusetts.
Podczas pracy jako kelnerka w barze sushi w Westmount, stały klient pomógł Lefevre w dostaniu się na casting do sitcomu "
Student Bodies". Nie dostała roli, jednak dyrektor castingu zadzwonił do niej z propozycją roli w kanadyjskim serialu "
Big Wolf on Campus" , w którym zagrała Stacey Hanson. Lefevre wystąpiła w "
Niebezpiecznym umyśle", wyreżyserowanym przez
George'a Clooneya. Pojawiła się również w filmach telewizyjnych takich jak "
Przelotna znajomość" czy "
Chłopak pilnie poszukiwany" i dostała rolę w komedii romantycznej "
Hatley High". W 2004 roku zagrała Ettę Place w filmie "
Legenda Butcha i Sundance'a".
Rachelle przeprowadziła się do West Hollywood, w Kalifornii tego samego roku i pojawiła się w filmach "
Głowa w chmurach" oraz "
Noel", w których zagrała obok
Penélope Cruz. W kwietniu 2004 roku Lefevre zagrała w filmie "
Król rzeki" obok
Edwarda Burnsa. Występowała również w sitcomie produkcji Foxa "
Life on a stick" w roli Lily Ashton, pracowniczki baru z fast foodami w centrum handlowym. Zagrała gościnnie w wielu serialach telewizyjnych, m.in. w "
Czarodziejkach" w roli Olivii Callaway i w piątym sezonie "
Undressed" jako Annie Isles. Rachelle Lefevre wzięła udział w castingu do głównej roli kobiecej Annie Cartwright w "
Life on Mars", remake'u
Davida E. Kelley'a oryginalnej serii BBC. Po nakręceniu odcinka pilotowego została jednak zastąpiona przez
Gretchen Mol.